Table 1 Details of FnCas9 variants designed by structure-guided protein engineering

en1

1369

E > R

en2

1449

E > H

en3

1369, 1449

E > R, E > H

en4

1243

G > T

en5

1369

E > Y

en6

1392

G > R

en7

1392

G > K

en8

1448

N > R

en9

1448

N > Y

en10

1451_1452

ins V

en11

1473

S > T

en12

1553

N > V

en13

1586

Y > H

en14

1586

Y > R

en15

1603

E > H

en17

1369, 1449, 1556

E > R, E > H, R > T

en18

1233

F > Y

en19

1475

A > F

en20

1499

S > H

en21

1580

S > R

en22

1583

K > R

en23

1609

K > V

en24

1609

K > S

en25

1609

K > N

en26

1605

S > F

en27

1605

S > R

en28

1386_1387

ins RR

en29

1586, 1603

Y > H, E > H

en30

1392, 1448

G > K, N > Y

en31

1243, 1369, 1449

G > T, E > R, E > H

en32

1369, 1392, 1449

E > R, G > K, E > H

en33

1369, 1448, 1449

E > R, N > Y, E > H

en34

1369, 1603

E > R, E > H

en35

1369, 1392

E > R, G > K

en36

1369, 1448

E > R, N > R

en37

1369, 1448

E > R, N > Y

en38

1369, 1475

E > R, A > F

en39

1369, 1580

E > R, S > R

en40

1243, 1369

G > T, E > R

en41

1369, 1556

E > R, R > Q

en42

1392, 1603

G > K, E > H

en43

1448, 1603

N > R, E > H

en44

1448, 1603

N > Y, E > H

en45

1475, 1603

A > F, E > H

en46

1580, 1603

S > R, E > H

en47

1243, 1603

G > T, E > H

en48

1556, 1603

R > Q, E > H

en49

1556

R > Q

en50

1369, 1449, 1556

E > R, E > H, R > Q