Table 1 Methods and CPA concentrations used to cryopreserve P. lividus eggs and obtain SEM and TEM images.

From: Ultrastructural examination of cryodamage in Paracentrotus lividus eggs during cryopreservation

Cryopreservation method

CPA concentration

Cooling rates

Thawing rates

Slow cooling

0.5 M, 1 M, 1.5 M, 2 M, 2.5 M, 3 M DMSO 1.5 M DMSO + 0.04 M TRE1.5 M DMSO + 0.75 M PVP 1.5 M DMSO + 0.2 M SUC 1.5 M DMSO + 1% BSA

1 °C/min11

280 °C/min water bath at 25 °C61

Vitrification by contact

NONE 0.5 M, 1.5 M, 3 M MeSo2 0.5 M, 1.5 M, 3 M EG

CVM™ kit 10,000  °C/min62

N/A

Droplet vitrification

NONE 0.5 M, 1.5 M, 3 M DMSO 0.5 M, 1.5 M, 3 M EG

3 and 5 mm droplets, 1320 and 960 °C/min respectively60

200 °C/min water bath at 37–40 °C63a

Straw directly into LN2

NONE 0.5 M, 1.5 M, 3 M DMSO 0.5 M, 1.5 M, 3 M EG

1827 °C/min50

2950 °C/min water bath at 25 °C64

  1. aThe thawing rates depend on the droplet size, and as these are not 100% reproducible, this value would be approximate.